Influence of levamisole and Freund's adjuvant on mouse immunisation with antigens of adults of the liver fluke Fasciola hepatica Linnaeus, 1758.

We have studied the influence of both levamisole (AL) and Freund's adjuvant (AF) on the immunisation of mice with the secretory antigens of adults of the liver fluke Fasciola hepatica Linnaeus, 1758. Total IgG antibodies were detected in all groups where the F. hepatica antigen was administered, been levels of IgG1 increased respect to IgG2a antibodies. During immunisation, IL-4 and IFN-γ were only detected in AL and AF groups, but after infection, IL-4 boosted in all groups. IFN-γ increased two fold in AF and AL groups compared to the saline solution (AS) group. Worm recovering was of 32-35% in groups administered without antigen whereas in AS, AL and AF groups recovering was of 25%, 12% and 8%, respectively. Macroscopical lesions in the liver were scarce in AL and AF groups. Our data suggest that immunisation of mice with antigens of F. hepatica enhances the immune response avoiding both liver damage and worm establishment after challenge infection. The murine model of fasciolosis has appeared to be useful to elucidate the mechanism by which the parasite modulates immune responses toward a Th2 type but also the development of Th1 type-inducing vaccines.

Evaluación de dos modelos quimioterapéuticos para el control de fasciolasis bovina en clima cálido-húmedo en México / Evaluation of chemotherapeutic models for the control of Fasciola hepatica in cattle in humid warm climate in Mexico

Con el objetivo de evaluar dos modelos de control quimioterapéutico contra Fasciola hepatica, en ganado bovino infectado de manera natural y localizado en una finca en el municipio de Nautla, Veracruz, México, se aplicó el triclabendazol (tbz) en una o dos ocasiones, en diferentes meses, para reducir al máximo la eliminación de huevos. Además, se determinaron los valores de anticuerpos anti-F. hepatica y los niveles séricos de gamma-glutamil transpeptidasa (ggt) y aspartato aminotransferasa (ast). Se trataron dos grupos (G) de 23 animales cada uno, con dosis de 12 mg/kg de tbz, el G-1, testigo, en enero y el G-2 en enero y mayo. Cada 45 días, durante 10 ocasiones, se recolectaron muestras de heces de todos los animales, para realizar el recuento de huevos en 5 g (hpg). Al mismo tiempo, se tomaron muestras de sangre de 15 vacas de cada grupo, con el fin de detectar en el suero, mediante ELISA, los anticuerpos anti-F. hepatica, así como valorar los niveles de ggt y ast por espectometría. El porcentaje de reducción de tasa de la media de hpg fue 27.6 más alto en el G-2 que en el G-1, lo que concuerda con los valores más bajos de ggt detectados en el G-2. Los valores medios de la ast no rebasaron el límite normal. Los niveles de anticuerpos fueron positivos y no parecen verse afectados por el tratamiento con tbz en ninguno de los grupos.

Evaluación de cuatro vehículos para formular un fasciolicida experimental / Evaluation of four vehicles to formulate an experimental fascioliscide

El objetivo del presente estudio fue seleccionar entre cuatro vehículos, el idóneo para formular un fasciolicida experimental denominado Alfa. Se utilizaron 25 ovinos criollos, libres de infección por F. hepatica, los cuales en el día 0, fueron infectados por vía oral con 200 metacercarias del parásito por borrego, administradas en cápsula de gelatina. En la semana 6, sólo 15 ovinos fueron reinfectados con otras 200 metacercarias por animal. Diez semanas después de la primera infección, los borregos fueron divididos en cinco grupos de cinco animales cada uno, previendo que de los 15 ovinos reinfectados, 10 quedaran insertos en los grupos 1 y 2, y los 5 restantes quedaran dentro del grupo testigo. Así, los grupos 1 al 4 fueron dosificados por vía oral, con 15 mg/kg del compuesto experimental, formulado con los vehículos 1, 2, 3 y 4, respectivamente, y el grupo 5 fungió como testigo, sin tratamiento. A las dos semanas postratamiento, se sacrificaron los ovinos y se cuantificaron las fasciolas en hígado. La eficacia se determinó con base en el porcentaje de reducción de fasciolas. Los resultados indicaron una eficacia contra fasciolas adultas, de 100 por ciento, 100 por ciento, 92.4 por ciento y 77.0 por ciento, para los grupos 1, 2, 3 y 4, respectivamente, y contra fasciolas juveniles de 100 por ciento y 100 por ciento, para los grupos 1 y 2, respectivamente. Se concluye que el compuesto Alfa formulado con los vehículos 1 y 2, mostró una eficacia del 100 por ciento contra fasciolas de 4 y 10 semanas de edad en ovinos, respectivamente.

DIG-ELISA: Estandarización y evaluación serodiagnóstica en fasciolosis bovina experimental y natural / DGI-ELISA: Standardization and serodiagnostic evaluation in experimental and natural bovine fascioliasis

Los objetivos del presente estudio fueron: Determinar la sensibilidad y especificidad de DIG-ELISA y establecer el valor de corte para realizar diagnóstico de fasciolosis bovina; determinar la capacidad diagnóstica de la prueba en bovinos infectados en forma experimental; valorar la seroprevalencia bimensual y durante un año de los títulos IgG anti-Fasciola hepatica en suero de bovinos infectados en forma natural; y comparar la variación con la presencia de huevos del trematodo identificados en el análisis coproparasitoscópico. Con el propósito de estandarizar la prueba, además de las correspondientes titulaciones de sueros, antígeno y conjugado, se utilizaron 80 sueros de bovinos, de estos últimos 40 pertenecían a animales provenientes del estado de Sonora (zona libre de fasciolosis) y 40 del estado de Hidalgo (zona enzoótica de fasciolosis). La prueba mostró una sensibilidad de 97.5 por ciento y una especificidad de 80.0 por ciento, obteniendo un valor de corte de 7 mm. En otro estudio, se infectaron 15 bovinos jóvenes de sexo indistinto, cada uno con 600 metacercarias del Fasciola hepatica. Los animales fueron sangrados semanalmente y durante 14 ocasiones para obtención de suero. La prueba fue capaz de detectar anticuerpos anti-F. Hepatica desde la segunda semana posinfección, logrando sus mayores incrementos expresados en diámetro de la zona de reacción (DZR) entre la séptima y décima semanas. En otro experimentos se utilizaron 85 bovinos criollos, hembras, de un rancho ubicado en un área enzoótica de fasciolosis en Nautla, Veracruz, en donde se colectó sangre para obtención de suero, así como heces de cada uno de los bovinos. Los animales fueron muestreados bimensualmente y durante un año para correr los cueros con DIG-ELISA y las heces para realizar análisis por sedimentación. Los porcentajes de seroprevalencia fueron del 58 por ciento, 73 por ciento, 80 por ciento, 100 por ciento, 96 por ciento y 79 por ciento para los meses de marzo, mayo, julio, septiembre, enero y marzo, respectivamente, mostrando porcentajes de positividad similares a aquellos obtenidos en el análisis coproparasitoscópico (P>0.01). Se concluye que DIG-ELISA mostró alta sensibilidad y fácil montaje para utilizarse bajo condiciones de campo en el diagnóstico temprano de fasciolisis bovina, generando resultados reproducibles que pueden ser de gran utilidad para estudios seroepidemiológicos